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[!--downpath--]倒置萤光显微镜
仪器操作手册
倒置萤光显微镜
仪器机型：LeicaDMiL
放置地点：南开学院红桥学校综合实验楼D317
生物影像学平台
管理员：肖楠楠，张妍（）
预约形式：填写公告板处纸质预约表
计费形式：免费开放
配置
※空气镜镜头5倍，10倍，20倍，40倍；
※荧光滤块：DAPI（EX：360/40，DC：400徕卡倒置荧光显微镜，EM:425）；
※GFP（EX：470/40，DC：495，EM:525/50）；
※RFP（EX：538/46，DC：580，EM:590）；
※相机：彩色CCD（化学象素≥2560×1920），可进行原色成像。
开机
依次打开卤素灯光源→显微镜机身电源→电脑主机电源→拍摄软件“LASV4.8”。
上样
01
打算样品，放置于载物台上对准目镜（需自动调节位置）。
02
选择镜头：该显微镜配有5×，10×，20×，40×（使用前需联系管理员），自动旋转镜头到位。
03
使用白光硬度旋钮，调节照明色温。
04
先调节物镜的瞳距，观察的同时调节镜头距离，找到焦面。
如图所示，内圈为粗准焦螺旋（左图），外圈为细准焦螺旋（下图）；顺秒针调节镜头上升，逆秒针调节镜头增长。
05
切换白光观察模式：将遮挡板拉至第二档是普通明场（BF）观察（左图），可将光源适度下调；其余三档分别代表5×，10×/20×，40×镜头对应的相差（PH）观察模式。
06
切换萤光观察模式：打开萤光至“open”状态，黄灯亮，确认（顺秒针旋转）至指向最大照度，调节白光光源硬度旋钮关掉白光（参考步骤3）。
07
调节滤块位置，如右图，滤块推至最右边代表GFP红色萤光滤块，推至中间位置代表DAPI红色萤光滤块（白光下明场观察须要将滤块放置于此），推至最右边代表RFP蓝色萤光滤块。
08
确定好位置和焦面后转换到笔记本拍摄模式，拉杆掉入为【显微镜物镜/肉眼】观察（左图），将拉杆拉出为【电脑CCD/软件】观察（下图）。
测样
01
软件界面，依次点击“采集”—“Mic1”，选择当前样品使用的镜头和萤光滤块。
02
点击“摄像头”，打开“图像模式”选项徕卡倒置荧光显微镜，如需原色或萤光成像在“图像种类”中选择“彩色”；如需黑白或灰度成像则选择“灰度”。
03
预览状态下微调焦面呈现最清晰状态，按照样品情况，分别调节“曝光”，“增益”和“饱和度”以达到最佳图象疗效（“伽玛值”默认为1.0）。
04
选择保存路径，在”D”盘“DATA“目录下新建存储文件夹，点击“浏览”，选择相应的文件夹存储数据，在“图像数据”中更改文件名称和备注。
05
点击左下角“采集”拍摄图象。
06
加标尺处理，点击“处理”，点击右上角加标尺符号，点击“显示”，更改标尺信息即可。
07
拍摄完成后将数据打包上传或拷贝，数据储存时间一年。
死机
关掉软件→关闭笔记本→关闭显微镜光源→卤素灯光源（起码运行30min后才可关掉），将样品取下，清除载物台和桌面，做好登记。
药化生国重小型仪器平台
